叶下珠提取物的抑菌活性

更新时间:2024-01-13 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:27640 浏览:129261

摘 要 :采用生长速率法测定叶下珠(Phyllanthus urinaria Linn)的5种溶剂提取物对大肠杆菌[Escherichia coli (Migula) Casleillii & Chalmers]、伤寒沙门氏菌[Salmonella typhi (Schroeter) Warren & Scott]、痢疾志贺氏菌[Shigella dysenteriae (Shiga) Castellani & Chalmers]、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus Frankland)、金葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)的抑制活性.结果表明,10 mg/mL叶下珠甲醇提取物、乙醇提取物和丙酮提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌有较强的抑制活性,其抑菌率均不低于60%,对大肠杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑制作用较弱,抑菌率均不高于60%;10 mg/mL水提取物和石油醚提取物对5种细菌的抑制作用弱,抑菌率均在51%以下.比较各提取物对5种供试菌的毒力可见,甲醇提取物对痢疾志贺氏菌的抑菌活性最强,其抑制有效中浓度(EC50)为2.915 5 mg/mL,乙醇提取物、丙酮提取物对金葡萄球菌的抑菌活性最强,EC50分别为3.440 2、4.320 6 mg/mL.

关 键 词 :叶下珠;提取物;抑菌活性

中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)12-2812-03


Study on Antibacterial Activities of Extracts from Phyllanthus urinaria Linn

DENG Zhi-yong

(College of Chemical and Biological Engineering, Hezhou University,Hezhou 542800,Guangxi,China)

Abstract: The antibacterial activities of 5 solvent extracts from Phyllanthus urinaria Linn against 5 species of bacterium were determined by growth rate method. The results showed that 3 solvent which were methanol, ethanol and acetone extracts had high antibacterial activities Shigella dysenteriae (Shiga) Castellani & Chalmers, Staphyloccocus aureus Rosenbach, Salmonella typhi (Schroeter) Warren & Scott with antibacterial rates more than 60%, and had low antibacterial activities against Escherichia coli (Migula) Casleillii and Chalmers, Bacillus cereus Frankland with antibacterial rates below 60%. The water extracts and petroleum ether extracts had low antibacterial activities against 5 species of bacterium with the antibacterial rates below 51%. The methanol extracts had the highest antibacterial activities against Shigella dysenteriae(Shiga) Castellani & Chalmers, whose EC50 was 2.915 5 mg/mL. The ethanol extracts had the highest antibacterial activities against Staphyloccocus aureus Rosenbach, which EC50 was 3.440 2 mg/mL. The acetone extracts had the highest antibacterial activities against Staphyloccocus aureus Rosenbach, whose EC50 was 4.320 6 mg/mL.

Key words: Phyllanthus urinaria Linn; extracts; antibacterial activities

植物源杀菌剂是指从植物中提取的具有杀菌、抑菌活性的物质,以及由其分离纯化的单体物质加工而成的药剂.从植物中寻找杀菌、抑菌活性物质已成为当今开发、研制无公害新型杀菌剂的热点之一[1].叶下珠(Phyllanthus urinaria Linn)为大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllanthus)草本植物,又名珍珠草、夜合草、阴阳草、油柑草等[2],全草入药,具有清热利尿、解毒、止泻、抑菌、体内和体外抗HBV[3]、防治肝细胞损伤[4]、抗乙型肝炎病毒[5]等作用.迄今,从叶下珠中已发现的化合物有40多种[6],包括生物碱类、黄酮类、木脂素类、萜类、鞣质等多种成分.试验研究了叶下珠5种溶剂提取物对大肠杆菌[Escherichia coli (Migula) Casleillii & Chalmers]、伤寒沙门氏菌[Salmonella typhi (Schroeter) Warren & Scott]、痢疾志贺氏菌[Shigella dysenteriae (Shiga) Castellani & Chalmers]、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus Frankland)、金葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)的抑制活性,以期发现新型抗菌物质,为叶下珠作为原料开发食品防腐剂提供理论依据,现将试验结果报道如下. 1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试病原菌 5种病原菌大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、蜡状芽孢杆菌、金葡萄球菌均来自广西师范大学生命科学学院微生物学实验室.

1.1.2 供试植物材料 叶下珠全株,采自广西壮族自治区贺州市郊区.

1.1.3 溶剂 甲醇、乙醇、丙酮、石油醚,市售分析纯;纯净水,自制.

1.2 方法

1.2.1 植物成分提取 采用冷浸法.取叶下珠全株,洗净风干,放入60 ℃的恒温鼓风干燥箱内烘干至发脆,用植物粉碎机将其粉碎,过425 μm筛.称取一定量的植物干粉放入三角瓶中,加入5倍量的溶剂,在室温下浸提(其间每隔12 h振荡1次)48 h后抽滤.再重复浸提2次,将3次滤液合并,用旋转蒸发仪减压浓缩,蒸干溶剂得膏状粗提物.称重,置于4 ℃冰箱中保存备用.

1.2.2 提取物抑菌活性测定 参照参考文献[7],采用生长速率法进行测定.

2.结果与分析

2.1 叶下珠提取物的抑菌活性

叶下珠5种溶剂提取物在10 mg/mL的浓度下对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、蜡状芽孢杆菌、金葡萄球菌都有一定的抑制作用(表1).5种溶剂提取物对5种细菌的抑制作用有较大的差别.总体上,甲醇提取物抑菌率较高,分别为87.85%(痢疾志贺氏菌)、85.00%(金葡萄球菌)、75.50%(伤寒沙门氏菌)、60.00%(大肠杆菌),51.89%(蜡状芽孢杆菌);其次是乙醇提取物,抑菌率分别为84.00%(金葡萄球菌)、75.55%(痢疾志贺氏菌)、67.37%(伤寒沙门氏菌)、42.90% (大肠杆菌)、16.67%(蜡状芽孢杆菌);再次是丙酮提取物,抑菌率分别为72.56%(金葡萄球菌)、68.23%(痢疾志贺氏菌)、64.60%(伤寒沙门氏菌)、29.67%(蜡状芽孢杆菌)、19.90%(大肠杆菌);水提取物和石油醚提取物对这5种细菌的抑菌率较低,都在51%以下.同一溶剂提取物对不同细菌的抑制作用有较大的差别.甲醇提取物对痢疾志贺氏菌的抑菌率最高,为87.85%;乙醇提取物对金葡萄球菌的抑菌率最高,为84.00%;丙酮提取物对金葡萄球菌的抑菌率最高,为72.56%.由上可知,甲醇提取物抑制作用最为明显,乙醇提取物次之,丙酮提取物第三;甲醇提取物对痢疾志贺氏菌的抑菌率最高,乙醇提取物对金葡萄球菌的抑菌率最高,丙酮提取物对金葡萄球菌的抑菌率最高.

2.2 叶下珠3种溶剂提取物对3种细菌的毒力

鉴于叶下珠甲醇提取物、乙醇提取物和丙酮提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌有较高的抑制活性,在实验室条件下进一步测试了这3种溶剂提取物对以上3种细菌的毒力,以y为死亡率机率值、 x为剂量对数值建立毒力回归方程,计算有效中浓度(EC50),结果见表2.叶下珠甲醇提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的抑制作用较强,有效中浓度分别为2.915 5、3.233 9、3.796 4 mg/mL;叶下珠乙醇提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的有效中浓度分别为3.980 5、3.440 2、5.324 1 mg/mL;叶下珠丙酮提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的有效中浓度分别为5.411 1、4.320 6、5.595 7 mg/mL.

3.结论

1)10 mg/mL叶下珠甲醇提取物、乙醇提取物和丙酮提取物对痢疾志贺氏菌、金葡萄球菌和伤寒沙门氏菌有较强的抑制活性,其抑菌率都不低于60%,对大肠杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑菌率较低,其抑菌率都不高于60%;而水提取物和石油醚提取物对这5种细菌的抑菌率都比较低,其抑菌率都在51%以下.

2)叶下珠甲醇提取物对痢疾志贺氏菌的抑菌效果好,其抑制有效中浓度为2.915 5 mg/mL;乙醇提取物对金葡萄球菌的抑菌效果好,其抑制有效中浓度为3.440 2 mg/mL;丙酮提取物对金葡萄球菌的抑菌效果好,其抑制有效中浓度为4.320 6 mg/mL.

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