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重庆理工大学科研创新团队

中期检查报告

(2016年5月-2016年12月)

团队wannengw@cqut.edu.

填报日期:2016-4-26

重庆理工大学

二O一三年制

简表

研究方向膜生物学与生物分子结构功能研究依托硕士点微生物与生化药学依托科研基地重庆市制药工程技术中心依托学科专业生物化学与分子生物学 研究工作完成情况

1,2016年5月-2016年12月研究计划(任务书中所定内容).

2016.11-2016.12细胞膜及膜蛋白具有重要的生理功能和特点,它在信号传导,物质跨膜转运,病原寄主的识别,免疫抗原性,药物的作用靶点等方面发挥了关键的作用,生命的本质在于其组成分子的结构和功能,本创新团队主要开展急性肺损伤过程中膜蛋白结构与功能变化情况的研究工作,也会涉及到细菌光合作用膜蛋白的表达及功能,以及肿瘤转移的相关膜蛋白的分子行为.

主要研究重点是:正常动物模型中膜蛋白SP在膜中的结构定位,分析正常动物模型中SP与膜磷脂的相互作用关系,用内毒素-脂多糖(LPS)建立急性肺损伤(ALI)模型,分析ALI动物模型中S与膜磷脂的相互作用关系,对SP膜外肽端进行疏水进化,形成SPm,分析SPm与膜磷脂的相互作用关系及稳定性,利用免疫沉淀法等研究ALI动物模型中SPm在膜上的定位,研究SPm在ALI动物模型中对膜功能的修复作用及效果评价.通过上述研究工作,初步明确与急性肺损伤相关性极高的功能膜蛋白SP的作用及变化特性,并将其用于急性肺损伤动物治疗试验,评价其膜功能的修复效果,为实际应用治疗提供相关的理论和技术支持.

2016.1-2016.12在膜生物学与糖生物学相结合方面也开展了一些研究工作,抵抗疾病的糖药物来源很广,其中大多数是天然存在的化合物,例如多糖类的糖苷类.由于多数以糖类为基础的药物的作用位点是在细胞表面,本团队在功能多糖与膜蛋白分子识别方面作一定的研究.

2,2016年5月-2016年12月研究计划完成情况(对照任务书中所定内容进行说明).

本创新团队膜生物学方向课题组将膜蛋白与急性肺损伤结合起来,开展了以下研究工作:

①通过免疫荧光技术确定SP-B蛋白在肺组织中定位.利用基因技术完成从RNA提取到T-SP-B与pEGFP-N2-SP-B重组质粒的构建,通过脂质体转染至CCL-149与A549细胞系,确定SP-B在细胞中的定位.

②通过生物信息学工具对模拟肽设计,筛选,并采用标准的Fmoc固相化学合成法合成.

③利用脂质体构建模拟膜,采用Wilhelmy式膜天平初步测定模拟肽体外活性.

④利用拉曼光谱法测定模拟肽对脂质链的构象的变化.分析多肽是否会促进脂质结构的有序性降低以及增强膜的流动性.

⑤建立大鼠离体肺灌洗模型,通过气管滴注验证模拟肽制剂对大鼠离体肺顺应性的作用.

通过实验,获得了以下的研究结果,具体如下:

①利用免疫荧光确定了SP-B蛋白在肺组织中定位.成功构建了T-SP-B与pEGFP-N2-SP-B重组质粒,测序结果正确.质粒转染结果显示SP-B在A549细胞系中主要定位于细胞质中,而在CCL-149细胞系中主要定位于细胞核与细胞膜上.

②通过生物信息学工具设计,筛选出了模拟肽K.委托吉尔生化公司合成多肽,HPLC结果显示纯度达到98.6%,质谱分子量结果与理论值一致.

③成功构建脂质体模拟膜,初步体外活性测定显示其能够有效降低气液表面张力.

④拉曼光谱分析结果显示在加入多肽后,使DPPC与DPPG的C-C骨架有序性构象降低,链间无序性增强.C-H的伸缩振动表明,加入多肽后增强双层膜的流动性,显示出了SP-B在PS中的所起到的作用.

⑤离体静态肺顺应性测定结果显示模拟肽制剂能够明显提高肺顺应性.

这些研究成果为进一步深化研究开发急性肺损伤的高效替补治疗剂奠定了良好的基础,本团队也准备在此基础上深入实验,对其作用进行评价.并已成功投稿"疏水性肺表面活性蛋白SP-B结构类似物的研究进展"至华西药学杂志,已录用待发表,SCI研究论文正在投稿中.

生物代谢调控方向课题组利用均匀设计的方法,进行试验方案设计,并对试验生产的白酒成份进行分析,打分,利用SPSS软件推导其数学模型反应方程式,确定出最佳的原料配比.针对多粮酒生产的特点对发酵工艺参数进行了优化,对发酵过程中微生物进行分离,鉴定,明确了微生物的动态变化,并在实际生产中进行调控.并利用化工原理建立蒸馏模型,通过蒸馏模型调控提高出酒率.还利用超声波等物理因素研究了快速陈化方法,分析其对酒微量成分的酒体质量的影响,并建立了多粮型小曲固态法调味白酒质量标准.

主要创新在于利用均匀设计方法确定原料品种及其最佳配比组成比例,以达到新产品质量标准,通过发酵工艺参数优化及各项理化指标监测分析,形成成熟的工艺参数体系及生产方案,多粮小曲固态法白酒发酵过程微生物动态变化过程,以及对其口感风味的影响,利用化工原理建立蒸馏模型,通过蒸馏模型调控提高出酒率,研究快速陈化方法,分析其对酒微量成分的影响.

通过本项目的实施,取得了明显的科研成果和实际生产应用效果所生产的小曲清香白酒产品醇厚丰满,甘润柔和,绵甜爽净,自然谐调,回味悠长,体现出了醇厚丰满,甜,净,爽的口味,多粮小曲清香白酒是在原有单粮的基础上的一个创新,把所生产的多粮小曲清香白酒应用在元帅酒,金江津等高端产品系列,进一步提高了其品质和价值,产生了非常好的经济效益和社会效应.

生物材料方向课题组主要开展了应用天然高分子(如蚕丝素蛋白,丝胶蛋白)制备生物相容性优良材料进行生物体组织工程系统构建和缓控释药物的开发和研究.将制备的纳米级蚕丝素蛋白与聚乙烯醇或壳聚糖等成立体支架状,构筑了组织工程三维支架,再将特定组织细胞"种植"于生物相容性良好,可被人体逐步降解吸收的含有蚕丝蛋白的三维支架上,为细胞的增长繁殖提供三维空间和营养代谢环境,随着材料的降解和细胞的繁殖,形成新的与自身功能和形态相适应的组织或器官,实现对病损组织或器官的重建或永久替代.本方向在功能性组织工程尿道构建方面取得了较大进展.同时制备了高血压药物缓释新制剂,以及肿瘤药物缓控释新制剂,取得成功.

糖生物学方向课题组主要开展了具有药用价值的寡糖(CS/HS为主)片段的专一规模化合成相关的生物技术应用基础和产品开发的研究,涉及到基因工程和酶工程等,已发表了相关论文两篇,并已向CSCD源期刊投稿一篇.

分子生物学方向课题组从分子水平阻断或激活相关信号通路来探讨其对某个生理活动的阻碍或促进作用是目前临床医药靶标治疗的关键所在.本方向在国家自然基金的资助下已经成功构建神经再生信号通路关键靶标分子的DNA疫苗5个.细胞实验显示5个DNA疫苗均能够显着促进神经元突触的伸长,抑制神经元的凋亡,动物实验显示其中3个DNA疫苗能够产生较强的免疫应答.脊髓损伤的免疫治疗实验正在进行中.研究成果拟申请专利2-3个,发表SCI论文2篇.

重庆市科委技术研究项目"填埋场甲烷长效缓释抑制剂的时空转化和生态响应研究"主要研究了以减少温室气体排放为导向,以控制有机废物甲烷排放为目标开展了"产甲烷菌抑制剂在生活垃圾填埋场时空转化与生态响应的研究"的研究,优选出了乙炔作为生活垃圾填埋场甲烷抑制剂,分离鉴定了具有高活性和高适应性的甲烷氧化菌株.添加低浓度的产甲烷菌抑制剂不但可以抑制生活垃圾的甲烷产生,而且对后期甲烷的生物氧化没有影响.该技术已应用到1万吨的生化垃圾甲烷减排示范单元.

3,取得的标志性项目和成果.

通过本创新团队各个课题组的共同努力,取得了一些阶段性的进展和成果,获得了国家自然科学基金"靶向复合Nogo核酸疫苗的制备及其对损伤脊髓的免疫治疗研究"(编号:81101464),已经成功构建神经再生信号通路关键靶标分子的DNA疫苗5个,为分子调控奠定了良好的前期研究基础.

获得了重庆市教委优秀成果转化资助项目"改良高效酿酒酵母在小曲清香白酒中的产业化应用"(编号:kjzh11216),为进一步深入研究多粮小曲清香白酒发酵调控及产业化创造了良好的研究开发平台.

由重庆理工大学和重庆市江津酒厂(集团)有限公司合作研发,王万能教授主持的"均匀设计优化多粮小曲白酒生产工艺"项目经过几年的研究,试验和推广,取得了显着的社会效益和经济效益,获得2016年度重庆市人民政府评定的重庆市科技进步三等奖.

三、团队运行机制及内部管理制度建设情况

为更好地完成本创新团队的工作任务,将建立完善的科研激励机制,为促进科研工作建立有利的政策措施,为科研成果快速转化搭建高效的平台条件,建立高效完整的组织管理模式,使本创新团队在科学研究,科研基地建设,学术交流,对外合作,队伍建设及人才培养等方面做出突出的成绩.

1,建立以主要研究人员为核心的各个研究方向课题组,如膜生物学方向课题组,生物代谢调控方向课题组,生物材料方向课题组,糖生物学方向课题组和分子生物学方向课题组.确立中心研究目标,明确重点研究内容和课题,确定每个团队成员在团队研究工作的职责和任务,特别加强对年轻教师的培养,使他们尽快地成长起来,形成科研队伍梯队,保证科研工作持续推进,而且把研究生培养工作融入到创新团队建设过程中.每半年检查考核一次,找出问题和差距,及时纠正方向,促进工作进展,保证对研究计划实施所需的人力,物力和工作时间等条件给予支持,督促项目负责人和本创新团队成员按照工作计划任务实时推进科研工作.


2,加强联络沟通机制,每两个月开一次工作联系会,讨论问题,分析进展,讨论课题和项目实施过程中的难题,及时解决科研思路和仪器设备等问题,推进工作.

3,建立完善的科研激励机制,进行绩效考核资助.以创新团队发展目标为导向建立奖惩励激机制,量化创新团队工作成果,对科研项目,成果和论文进行资助奖励.对争取到国家,省部级项目,发表论文和获得专利及科研成果的团队成员或课题组进行相应的经费资助,为他们的科研创造更好的研究条件.

4,根据学校的规定和团队成员的个人意愿建立了相应的约束机制,如准入和准出机制,其他教师可根据自己的研究情况,结合团队课题方向可申入,承担相应的研究任务和职责,团队成员也可根据自身情况退出本团队,科研成员都按时间段进行计算.

5,在科学研究方面进一步凝聚科研方向,形成有机融合高效运转的科研团队,立足前沿科学,积极争取国家级,省部级科研项目,全力开展科学研究,建立了生物代谢调控和分子生物学研究实验平台,为进一步开展科研工作提供方便,强力推进科研工作,使科研工作进入良性循环轨道,增强科研发展后劲.

6,加强学术交流,与国际,国内相关科研单位及研究同行保持联系,沟通,同在科研优势上具有互补的科研院所进行合作,促进科研信息交流,确保科研工作持续进展.特别是加强了与第三军医大学大坪医院野战外科研究所,创伤,烧伤与复合伤国家重点实验室的合作,引智借力,进一步使本创新团队在学科上形成交叉融合的优势.

四,年度建设目标完成情况

考核目标与完成情况对比

2016年5月-2016年12月

考核目标(任务书中所定内容)完成情况(1)队伍建设建设学术梯队,搭建科研平台形成了五个研究方向的课题组,建立了生物代谢调控和分子生物学研究实验平台.(2)科研项目申请国家级,省部级科研项目4-8获国家自然科学基金项目1项,获省部级项目8项,其他横向项目10项.(3)成果奖励申报省部级二等科研成果奖1项或三等科研成果奖1项获重庆市科技进步奖三等奖1项.(4)申请,授权专利申请或获得国家发明专利4-9项获得国家发明专利5项,申请公开国家发明专利6项.(5)发表论着投稿SCI论文3篇,或重要学术期刊A类2篇,或B类,EI2篇投稿SCI论文2篇,发表核心期刊论文11篇.(6)学术交流聘请国内专家进行一次学术交流

开展了两次学术交流活动,分别邀请第三军医大学周继红教授和美国王翊博士后,杨宇新博士来校讲学交流.(7)人才培养培养招收研究生5-8名培养研究生8名.(8)其它方面无无

2,完成情况明细

(1)科研项目序号项目名称负责人项目来源/计划类别批准编号拨款经费(万元)起止时间排名1靶向复合Nogo核酸疫苗的制备及其对损伤脊髓的免疫治疗研究鲁秀敏国家自然科学基金81101464/H170144.02016.12-2016.12第一2改良高效酿酒酵母在小曲白酒3纳米丝素蛋白药物缓释复合材料的制备,性能与应用基础研究4功能化组织工程尿道的构建及临床应用研究陈忠敏重庆市高等学校优秀人才支持计划项目2016CQ045.02016.10-2016.9第一5基于急性肺损伤修复SP-B模拟肽研究创伤,烧伤与复合伤国家重点实验室开放课题基金2016.04-2016.04第一6纤维素分子改性及仿生高效酶解体系研究王万能重庆市教委KJ1208112.02016.6-2016.11第一7高耐胁迫甲烷消耗菌的筛选鉴定与动力学研究张丽杰重庆市科委3.02016.10-2016.10第一8Nogo-66核酸疫苗接种对脊髓损伤的修复作用鲁秀敏重庆市教委KJ1008042.02016.10-2016.12第一9烤烟调制过程中淀粉蛋白降解转化及调控研究王万能中国烟草总公司重庆烟草科学研究所2016Q14940.02016.1-2016.12第一10香菇多糖深层发酵的诱导调控及分离纯化王万能重庆市知识产权局2016CC025.02016.8-2016.12第一11金属矿区土地的生物治理及生态修复研究王万能重庆市国土资源局20161811.02016.12-2016.6第一12五粮型小曲白酒生产工艺及质量控制王万能横向课题2016Q6210.02016.6-2016.6第一13重庆烤烟生长调制过程中TSNAs的动态变化规律研究王万能中国烟草总公司重庆市公司NY2016060107000927.02016.03-2016.05第一14超声波协同酶法提取大豆异黄酮工艺技术研究王万能重庆市九龙坡区科委2016Q064.02016.8-2016.8第一15木瓜酒澄清工艺研究杨艳红金立方酒业2016Q2219.02016.6-2016.8第一16纤维素分子改性及酶解转化体系的研究王万能重庆理工大学启动基金2016ZD054.02016.3-2016.8第一17填埋场甲烷长效缓释抑制剂的时空转化与生态响应研究张丽杰重庆市教委KJ1108122.02016.5.-2016.5.第一18抗肿瘤香菇多糖的发酵调控工艺技术研究王万能重庆市九龙坡区科委2016Q055.02016.8-2016.8第一19全茧蛋的制备工艺陈忠敏横向课题10.02016.8-2016.7第一(2)获省部级科研成果奖序号成果名称负责人奖励级别获奖时间排名1均匀设计优化多粮小曲白酒生产工艺王万能2016年度重庆市科学技术进步奖三等奖2016.11第一(3)申请,授权专利序号专利名称负责人专利类型申请,授权专利号时间1纤维素酶协同超声波提取豆粕异黄酮的方法王万能发明专利ZL200710078374.52016.4.132一种纳米蚕丝丝素蛋的制备方法陈忠敏发明专利ZL200710092969.62016.7.13

3一种细胞培养载体制备方法陈忠敏发明专利ZL201610104397.82016.8.314一种具逐步降解性能的丝素共混材料的制备方法陈忠敏发明专利ZL201610200716.22016.10.245一步法分离纯化海藻糖的工艺张丽杰发明专利ZL201610103610.32016.6.86福寿螺的纤维素酶定向进化方法王万能发明专利201610191123.72016.10.147一种分离产生纤维素酶细菌的方法王万能发明专利201610065775.32016.3.178锰氧化微生物的分离,筛选方法王万能发明专利201610418370.32016.12.149微生物协同植物治理锰污染的方法王万能发明专利201610417472.32016.12.1410用微生物还原锰的方法王万能发明专利20161041872102016.12.1411纤维素酶水解纤维素的方法王万能发明专利201610418723.X2016.12.14(4)发表论文序号论文名称第一作者期刊名称

(影响因子)卷(期)页引用

次数1丝胶/PVA/玉米淀粉共混凝胶膜的制备及其体外降解调控研究陈忠敏功能材料,EI收录

EI:201613148996492016.4457-4612镶嵌纳米级再生丝素蛋白聚乙烯醇膜的制备与促细胞生长性能陈忠敏生物医学工程学杂志,核心期刊2016,523-283ANovelScreeningMethodofCellulase-producingBacteriaBasedonPhytophthoraparasiticar.nicotianae王万能AppliedBiochemistryandMicrobiology,SCI收录:760JO2016,47(1)49-524细胞膜中的功能筏及膜穴系统王万能桂林理工大学学报,核心期刊2016,31(2)273-2775紫色光合细菌捕获太阳能的分子机理王万能应用与环境生物学报,2016.3,17(1)138-1436响应面法优化小球藻中叶绿素盐的超声波制取工艺王万能食品工业,核心期刊2016,34(4)115-1187含不齐羧基钴酞菁的制备及其分子聚集效应比较陈忠敏材料导报,核心期刊2016,25(2)45-488模拟胃环境中丝素蛋白复合材料的溶蚀机制陈忠敏丝绸,核心期刊2016,49(4)1-49再生纳米丝素蛋白/聚乙二醇接枝化合物的合成工艺与表征陈忠敏材料导报,核心期刊2016,26(3)10-1310丝胶蛋白的细胞相容性和抗菌性能研究陈忠敏丝绸,核心期刊2016,49(11)1-511大孔树脂对木瓜酒单宁的吸附性能研究杨艳红食品研究与开发,核心期刊2016,33(7)1-412大孔树脂对木瓜鞣质的吸附及解吸附性能研究杨艳红安徽农业科学,核心期刊2016,39(8)4509-451013鲐鱼软骨糖胺聚糖的硫酸软骨素的结构及其与生长因子的相互作用周跃钢农业生物技术学报,核心期刊2016,2048-53(5)出版着作序号着作名称第一作者出版时间出版社名称注:可加行 五,经费使用情况

1,2016年-2016年拨款到位金额:15.78(万元)

2,2016年-2016年拨款经费使用支出情况:

科目建设期

总预算数2016年-2016年

支出(万元)备注(一)研究经费2012.1881.实验及材料费63.1实验材料药品及分析检测2.实验及办公设备费21.8办公条件改善3.出版物/文献/信息传播事务费21.32论文,专着出版资助4.学术交流费31.8学术会议交通住宿费5.调研差旅费21.698团队成员调研差旅费6.信息采集费7.专家咨询费21.8专家咨询劳务费8.研究生劳务费10.07研究生劳务补助费9.业务接待费20.6专家咨询交流接待费(二)其它经费

六,存在的问题和改进措施

本团队经过两年多的建设,有了一定的发展和进步,但也还存在一些明显而突出的问题,研究力量还不是很集中,重点研究方向还凝练不够,工作重点还不明显,团队研究成果和优势不够突出.

针对当前存在的问题,经团队成员讨论和研究,一致认为从以下几个方面进行整改和推进,促进本团队的快速健康发展.进一步凝练重点研究方向,加强研究队伍建设,完善研究平台条件,尽快总结前期研究结果,发表高水平的研究论文,争取一些对本团队基础研究和地方经济建设有一定影响力的重大项目,形成一批有显着社会效益和经济效益的重大成果. 七,依托科研基地意见

负责人(签字)

年月日

八,所在二级单位意见

(签章)

年月日

九,科研处意见

(签章)

年月日

十,专家评审意见

(签章)

年月日

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