本站原创摘 要 目的：构建携带受Tet-On以及VEGF启动子双调控基因HSVtk的重组腺相关病毒栽体,研究其在乳腺癌细胞MCF-7中的可调控表达.方法：用PCR方法扩增VEGF启动子,将其插入pA/TRE/HSVtk/Tet-On中形成重组栽体pA/VEGF/TRE/HSVtk/Tet-On质粒.进行病毒包装后得到了rA/VEGF/TRE/HSVtk/Tet-On重组腺相关病毒.用重组腺相关病毒感染乳腺癌细胞株MCF-7和正常乳腺HBL-100细胞,用MTT法及RT-PCR检测在Dox诱导下,GCV对rA感染的MCF-7细胞和HBL-100细胞的杀伤作用以及HSVtk基因在MCF-7细胞内的表达情况.结果：在rA+Dox+GCV组,GcV对rA感染的MCF-7细胞的杀伤作用明显高于rA+Dox组,rA+Dox组以及HBL-100组,并且RT-PCR结果显示经Dox诱导HSVtk表达较明显.结论：成功构建了携带双调控基因的重组腺相关病毒栽体.该病毒栽体能有效的感染乳腺癌细胞MCF-7,并能联合GCV治疗,抑制肿瘤细胞生长.而且具有靶向性.
关 键 词 ：基因治疗；腺相关病毒；VEGF启动子；HSVtk基因；TenOn
中图分类号：Q784 文献标识码：A 文章编号：1673―6273(2009)08―1424―04