大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化

更新时间:2024-03-28 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:6386 浏览:19435

摘 要目的:建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)的分离培养条件,以获得群体均一、未分化状态保持良好的MSCs.方法:收集不同周龄大鼠骨髓细胞;以不同浓度 Percoll 密度梯度离心分离骨髓单个核细胞;以 60%低糖DMEM40%MCDB201 为基础培养基,培养 24h 去悬浮细胞;以不同接种密度传代培养;碱性磷酸酶染色和油红O 染色考察 MSCs 向骨和脂肪组织分化的潜能.结果:采用57%Percoll 液的分离效果优于 70%Percoll液.6 周龄(体重约180g)大鼠能在细胞分离的质和32量上达到最佳效果.24h 进行悬浮细胞去除、5× 10 /cm 接种密度传代培养,光镜和电镜显示 MSCs 增殖能力强,功能状态活跃,成脂成骨实验显示多向分化潜能保持良好.结论:优化大鼠周龄、分离液的密度、细胞培养条件及改进培养方法有助于获得多向分化潜能保持良好的均一的MSCs.


关 键 词 :间充质干细胞;分离;培养;优化

中图分类号:Q813.1+1 文献标识码:A 文章编号:1673-6273(2008)01-0037-03

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